2000年，与王艳、郑昊共同主演都市言情剧《明星制造》，自此开始演艺事业。
2001年，在庞好执导的爱情题材剧《某年某月某一天》中饰演东方可儿。随后出演梦继执导的悬疑剧《杀青》。同年领衔主演苏舟执导的古装爱情剧《一代名妓苏小小》，在剧中饰演南齐钱塘艺伎苏小小。
2003年，参演根据中国首届“十大杰出母亲”沈利萍真实故事改编的电视剧《撑起生命的蓝天》。
2005年，在李威执导的家庭情感剧《情归西西里》中饰演鲍德明的妻子庄彩霞。同年在打击走私题材剧《沧海英雄》中饰演刘冬梅。
2007年，参演刘惠宁执导的都市情感剧《女人心事》。2008年，与于震、施京明共同主演抗日谍战剧《海狼行动》，在剧中饰演冷峻干练又不乏妩媚的日本女间谍川岛芳子。
2009年1月，在年代情感剧《纯真的年代》中饰演高干子弟段玲；3月12日，参演的谍战剧《剑谍》在武汉文艺频道首播，在剧中饰演男主角方滔的初恋女友秦岚。同年在都市轻喜剧《一路顺风》中饰演D233次列车的列车长林晓枫。随后出演孙皓执导的情感伦理剧《爱过我，放了我》。
2010年，在都市情感剧《大女当嫁》中饰演小文。同年与涂松岩共同主演战争军事剧《惊天阴谋》，在剧中饰演化装成“音乐教师”的女间谍松山秋子。
2011年，在陈家林执导的人物传记题材剧《嘎达梅林》中饰演达尔罕王的新婚福晋朱博儒。同年在黄力加执导的年代情感剧《菊子》中出演粗俗满口脏话的女人金枝。之后与马境、桑叶红共同主演《米脂婆姨》，饰演开展革命运动的共产党员何莲。
2012年，在谷锦云执导的革命战争剧《尖刀队》中饰演林凤兰。同年在古代传奇剧《施公案》之《天水间》中饰演莫愁舅妈；9月，王亚梅签约北京大唐辉煌传媒股份有限公司；12月31日参演的古装神话剧《妈祖》在CCTV-8首播。
2013年6月，加盟海涛执导的古装悬疑系列电影《少林寺探案传奇》之《王陵之谜》；12月，王亚梅受邀做客广西卫视《收藏马未都》栏目。
2014年，在都市情感剧《喜事成双》中饰演企业家易顾明的妻子金淼炎。
2015年，在刘雪松执导的都市情感励志剧《下一站婚姻》中饰演外表坚强内心柔弱的周丽君。
2017年，参演《桔子街的断货男》，饰演刘蓉。
作品奖项
王亚梅气质冷艳，演技深厚，演绎女间谍十分传神。王亚梅作为演员，能够懂得这么多中国古代的传统文化，还是很值得赞扬的。王亚梅真诚的演技为观众带来很多感动，诠释了很多经典角色。王亚梅给观众留下的一直是气质女人印象，但是在演艺道路上，她一直在突破自己。
谈及角色塑造过程，王亚梅表示最初找不到角色的心理动机，不理解她在事业和孩子之间的选择，后来剧组的主创们互相配合排戏，讨论角色有很大的帮助，试装时还没完全找到感觉，在开机后的第二天慢慢抓住了角色。“刘蓉这个角色本身很犀利、是个女强人，性格也比较二，当年的离开也是无奈，她自己就像孩子一样，还没有长大不成熟。而20年后回来，发现与孩子之间缺失的爱和感情，是用金钱和物质弥补不了的，这也是角色成长和丰富自我的过程。”
